
王錫峰研究團(tuán)隊(duì)首先以酵母雙雜篩庫(kù)得到的介體灰飛虱卵黃蛋白原(Vg)部分序列為基礎(chǔ),通過(guò)cDNA末端快速擴(kuò)增技術(shù)得到了編碼蛋白的基因全長(zhǎng)。采用體外試驗(yàn)Pull-down試驗(yàn)證明了Vg的一個(gè)結(jié)構(gòu)域與RSV的外殼蛋白有強(qiáng)的結(jié)合,利用免疫熒光共聚焦顯微鏡技術(shù)結(jié)合灰飛虱卵巢不同發(fā)育階段RSV和Vg含量的測(cè)定,明確了RSV病毒粒子在卵巢內(nèi)的出現(xiàn)與Vg的表達(dá)存在顯著的時(shí)序關(guān)系,灰飛虱成蟲(chóng)II期卵巢生殖區(qū)內(nèi)Vg與RSV的病毒粒子完全共定位。進(jìn)一步利用RNA干擾技術(shù)證明了Vg基因沉默后,卵巢內(nèi)的RSV含量也相應(yīng)的降低。經(jīng)過(guò)如上系統(tǒng)詳實(shí)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),研究團(tuán)隊(duì)提出了RSV經(jīng)卵傳播的新機(jī)制,即進(jìn)入到血淋巴的RSV通過(guò)與Vg的結(jié)合被Vg的受體帶入到了卵巢的生殖區(qū),然后病毒與Vg分開(kāi),經(jīng)營(yíng)養(yǎng)絲直接進(jìn)入到卵母細(xì)胞內(nèi),隨著卵母細(xì)胞進(jìn)而傳遞給了后代。
這項(xiàng)發(fā)現(xiàn)為研究其他可卵傳植物病毒的卵傳途徑提供重要理論啟示和借鑒作用,有助于制定病毒控制的新策略。該研究得到國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目和國(guó)家自然科學(xué)基金的資助。相關(guān)研究成果發(fā)表在《PLoS Pathogens(科學(xué)公共圖書(shū)館 病原)》上。(通訊員 孫爻)
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